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YMC色谱柱常见问题,YMC色谱柱的处理,色谱柱的清洗方法,色谱柱可以使用的pH与温度

色谱柱的压力上限是多少？

色谱柱压力上限大致为：柱长≤150 mm，压力上限为20 MPa；柱长=250 mm，压力上限为25 MPa。具体压力上限请参考各个产品对应使用说明书。另，柱内径≥10 mm的，压力上限为10 MPa，如需耐高压制备柱产品请订购Actus系列产品。

以下为我司备有的耐受高压条件的色谱柱产品：

  • YMC-Triart 1.9 μm ： 压力上限 100 MPa
  • YMC-Triart 3 μm, 5 μm (产品型号尾号 PTH) ： 压力上限 45 MPa (推荐使用压力≤30 MPa)
  • Meteoric Core ：压力上限 60 MPa
  • YMC-UltraHT (柱长≥50 mm) ：压力上限 50 MPa
  • YMC-UltraHT (柱长=30 mm) ：压力上限 40 MPa
  • YMC-Actus ：压力上限 30 MPa

色谱柱可以使用的pH与温度是多少？

色谱柱可以使用的pH与温度请参见下表。

产品名称

pH范围

可使用温度

推荐

使用上限

Triart C18, C18ExRS, C8

1 – 12

20-40℃

pH 1-7  : 90℃
pH 7-12 : 50℃

Triart Phenyl

1 – 10

20-40℃

50℃

Triart PFP

1 – 8

20-40℃

50℃

Triart Bio C4

1 – 10

20-40℃

pH 1-7  : 90℃
pH 7-10 : 50℃

Pro C18, Hydrosphere C18

2 – 8

20-40℃

50℃

Pro C18 RS

1 – 10

20-40℃

50℃

J’sphere ODS-H80

1 – 9

20-40℃

50℃

PolymerC18

2 – 13

25-35℃

65℃

Triart Diol-HILIC

2 – 10

20-40℃

50℃

其他反相色谱柱
正相色谱柱 (SIL, Polyamine II 等)

2 – 7

20-40℃

50℃

因上记表格未能涵盖所有产品，详细介绍请参见各柱使用说明书。

需要如何保存色谱柱？

对于长期不用的色谱柱，推荐将色谱柱置换成出厂检测报告记载的封存溶剂并避免放置于高温条件保存。即使是短期内要用的色谱柱，也应避免放置于含盐或酸的流动相条件下保存。为避免柱内溶剂的挥发，请拧紧柱两头密封栓。

柱性能检测时有哪些注意事项？

进行柱性能确认时，请使用出厂检测报告条件测定。样品溶解溶剂如未特别说明，多采用记载的流动相为溶剂溶解。如保留时间、理论塔板数、峰形等无异常，则可视为柱性能未发生明显改变，可以继续使用。需注意，如果是已购买了多年的色谱柱，即使上述性能指标看似正常，也可能会存在对离子性化合物等分离特性发生改变的状况。请避免用此类状况的色谱柱用于新分析方法的开发，以免出现新购色谱柱无法重现的状况。

常规色谱柱出厂时的封存溶剂是什么？

Triart 系列反相柱使用100%乙腈。Pro系列及YMC-Pack ODS-A，AM, AQ等反相色谱柱的封存溶剂为60%乙腈。其他色谱柱请参见各柱的使用说明书。

色谱柱的清洗方法是？

  1. 针对强疏水性吸附物的清洗方法
    一般使用比流动相条件洗脱力高的溶剂进行清洗。如：反相条件，提高有机溶剂的占比，进行10倍柱体积的通液
  2. 2.为恢复柱表面状态进行的清洗（当峰形与保留时间出现异常时）
    针对硅胶填料的情况，有时会因残留硅羟基的存在形式（解离、非解离态）而影响分离行为。为复原成初始状态，可尝试酸洗。通过使用0.1%磷酸/有机溶剂的混合溶液（有机溶剂占比10~60%左右），可将硅羟基还原成非解离态。

加个保护柱真的有用吗？

对过多杂质的样品分析使用保护柱是有效的，可延长柱寿命。选用保护柱时推荐选用与色谱柱相同填料的保护柱。当选用不同保护柱时，可能会存在峰型或再现性不佳的情况。保护柱常规有一体式和卡套式两种类型。当需要频繁进行保护柱更换时，推荐使用卡套式保护柱。另外保护柱推荐选用与色谱柱内径相同或偏小一些的型号。

色谱柱产品尾号”WT”、”PT”、”PTH”、”PTP”分别代表什么？

色谱柱产品尾号字母代表色谱柱的接头类型。WT为Waters型接头、PT、PTH、PTP为Parker型接头。目前市面上销售的色谱柱多为这两种类型。除了waters型、Parker型以外，市面上还有岛津型、日本分光型、日立型接头等。这些接头的主要差异点之一为伸出接头部分的管线长度差异。当连接色谱柱部位为不锈钢材质管线与接头时，为避免漏液或峰形不佳，选择适合的接头型号是必要的。

使用半微量色谱柱时，设备与流速应该怎样设置？

使用半微量色谱柱（内径为1.0～2.0 mm I.D的色谱柱）时，一般将流速设定为50~200uL/min。如果柱长偏短且背压偏低时，可升高流速。虽然也可以使用常规HPLC，但为防止样品扩散引起的理论塔板数低下，倾向于选用适于半微量测定的泵、检测器内流通池及管路。

如何进行色谱柱的方法规模放大？

当需要进行制备时，方法规模放大可按下述步骤进行：

  • 步骤1
    使用分析柱进行纯化分离条件的摸索
  • 步骤2
    进行制备规模的摸索探讨。根据制备量选定计划使用柱的内径大小和填料颗粒径。
  • 步骤3
    使用选定好的填料装填而成的内径为4.6mm或6.0mm等的分析色谱柱进行制备条件的最佳化摸索。当使用与步骤1相同的分析柱与填料粒径时可省去此步骤。当制备规模内径≥100mm时，使用内径为20mm的色谱柱进行上样量的确认和运营费用的估算。
  • 步骤4
    实施制备纯化。