C38H37ClN2O5
637.17
特点：
● 基于膜电位对线粒体染色
● 红色荧光
● 激发和发射波长分别为560 nm和580 nm
特性：该产物为品红色至紫棕色固体，可溶于二甲基亚砜和甲醇。
可溶于二甲基亚砜：试验成功
NMR光谱：试验适合
产品概述
MitoRed为基于罗丹明的可透过细胞膜的染料。它集中于线粒体内并发出红色荧光。MitoRed与线粒体的相互作用取决于线粒体的膜电位。
可用20-200 nM MitoRed对线粒体染色。MitoRed的激发和发射波长分别为560 nm和580 nm。
荧光特性
λex=560 nm, λem=580 nm
操作说明
染色步骤
1. 将50 µg MitoRed溶解到78 µl DMSO中制备成1 mM MitoRed-DMSO溶液。
2. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104-5×105个/ml。
3. 孵育该载玻片，用PBS或Hank’s液洗涤细胞。
4. 用培养基稀释1 mM MitoRed溶液以制备20-200 nM MitoRed缓冲液。
5. 将MitoRed缓冲液a) 加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
6. 去除MitoRed缓冲液并用培养基洗涤细胞。b)
7. 用带有罗丹明滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 加入细胞前将MitoRed缓冲液放在37℃下孵育。
b) 洗涤细胞后为了固定，加入10%福尔马林缓冲液并孵育15-20分钟，接着用PBS洗涤。
文献
1) R. Ikeda, T. Sugita, E. S. Jacobson and T. Shinoda, “Effects of Melanin upon Susceptibility of Cryptococcus to Antifungals”, Microbiol. Immunol., 2003, 47(4), 271.
常见问题Q&A
| Q1:如何使用Mito Red。 |
| A1：
下面显示了一个使用HeLa细胞的示例。 *根据细胞类型和观察条件，有必要检查试剂浓度和染色条件。 <试剂> -Cellstain®-MitoRed 二甲基亚砜 用DMSO 78μL→1 mmol / L溶液溶解MitoRed 50μg（1瓶） <操作方法> 1.培养小室玻片上的细胞，以使细胞密度合适。 （1×105至1×106细胞/ mL） 2.除去培养基，并轻轻洗涤（培养基，PBS，Hank溶液等）。 用中等浓度将3.1 mmol / L的MitoRed溶液稀释至最终浓度为20-200 nmol / L。 （最好先将其在37°C的温度下保温，然后再添加到细胞中） 将稀释的MitoRed溶液加入孔中，并在培养条件下孵育大约30分钟至1小时。 4.除去MitoRed溶液，并用中性溶液洗涤。 5.在荧光显微镜G激发下观察。 （Λex= 560 nm，λem= 580 nm） 固定电池时，请执行以下（3）之后的操作。 4.除去MitoRed溶液并洗涤。 （无血清培养基，PBS，Hank溶液等） 5.用5.10％中性福尔马林缓冲液固定15至20分钟。 6.用PBS清洁。 7.在荧光显微镜下观察。
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Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。 |
| A2： |
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Q3：不管是活细胞还是死细胞，它都会染色细胞内线粒体吗？
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| A3:仅活细胞。它不能用于死细胞，因为线粒体的膜电位会丢失。 |