Mebiol Gel®温敏水凝胶,Cosmobio水凝胶常见问题

Mebiol® Gel PNIPAAm-PEG 3D Thermoreversible Hydrogel 3D热可逆水凝胶

聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物,可用于3D细胞培养和其他应用

水凝胶是一类具有网状结构和高含水量的高分子材料,许多种类的水凝胶已被广泛应用于医学和生命科学研究中,不仅仅局限在3D细胞培养、组织工程和药物传递。非常适用于细胞培养和组织工程的特性促使科研用的Mebiol® Gel水凝胶(N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇共聚物)在2000年商品化。

产品原理

Mebiol® Gel温敏性水凝胶与其他市售水凝胶的不同之处在于,它可以根据温度的变化进行溶胶-凝胶的转换。低温时,Mebiol® Gel为溶胶状态(类似液体),而在温度较高时则形成硬的水凝胶。这一特性特别有利于在实验中进行细胞操作。可轻松向冷的Mebiol® Gel中加入培养基,通过给培养瓶降温离心收集细胞。在凝胶状态下,Mebiol® Gel的高亲脂性为细胞增殖、细胞信号转导、气体质量交换、细胞和组织抵抗剪切力提供了有效的环境。

产品特点

⑴易于操作

⑵无毒,生物相容性好

⑶100%合成,无病原体

⑷高透明度利于观察细胞

⑸产品性能经过验证

   产品货号    产品名称    规格
   MBG-PMW20-1001    Mebiol® Gel    1*10ML
   MBG-PMW20-5001    Mebiol® Gel    1*50ML
   MBG-PMW20-1005    Mebiol® Gel    5*10ML
   MBG-PMW20-5005    Mebiol® Gel    5*50ML

Cosmobio水凝胶常见问题

◆ 物理特性

● 当温度高于37℃,甚至高于60℃时,水凝胶将会发生什么变化?

随温度升高水凝胶将会变硬。

● 在0-60℃温度范围内,溶胶/凝胶/水凝胶发生相态变化的温度范围分别是多少?凝胶相可逆变化的温度范围是多少?

0℃-15℃:溶胶

15℃-20℃:溶胶和凝胶的中间体

20℃:相态变化的温度转折点

20℃以上:水凝胶

37℃以上:随温度升高,水凝胶开始变硬。

● 二氧化碳和营养物质是如何供给细胞的?在水凝胶状态下可以溶解到细胞内吗?

可以的,营养物质和二氧化碳在水凝胶中通过多层营养培养基扩散进入细胞。

● 温度为37℃时水凝胶的结构强度是多少?

关于此问题,请参考以下的参考文献:

Yoshioka H et al, A Synthetic Hydrogel with Thermoreversible Galation and Rheological Properties, Journal of Macromolecular Science, Part A: Pure and Applied Chemistry Volume 31, Issue 1, 1994

● 水凝胶上有小孔吗?

水凝胶上没有任何空隙或小孔。

● 凝胶对二氧化碳、氮气和氧气是可渗透的吗?

是的,二氧化碳、氮气和氧气的可以通过凝胶渗透。

● 当Mebiol Gel®处于水凝胶状态时,细胞会被水凝胶包围,那有足够的空间供细胞生长吗?

即使当Mebiol Gel®处于凝胶状态即37℃时,其交联点也是可变的,即会随细胞形态的变化而变化,且没有空隙或间隙。

● 在适当的温度下,Mebiol Gel®从溶胶变成凝胶需要多长时间?

3分钟

● 溶胶-凝胶的转换可以重复多少次?

正常情况下溶胶-凝胶相互转换可重复多次,直到Mebiol Gel®被化学分解。另外,溶胶-凝胶相互转换的次数取决于稀释后的储存温度或氧密度。稀释后若置于4℃储存,Mebiol Gel®可稳定1-2个月的时间,若分装后置于-20℃或-80℃储存,则可稳定更长的时间。

● 多大分子量的营养物质可通过凝胶?营养物质的移动距离与分子量之间有什么相关性呢?

可通过37℃水凝胶扩散的营养物质的最大分子量约为10000‐90000(确切尺寸未知)。如果营养物质的分子量为数千,即1000-9000,在凝胶中扩散是没有问题的。但如果营养物质的分子量超过9000,那在扩散的时就有问题了。营养物质自身的分子量越小,在水凝胶中移动的距离就越长。

● 是否可以提供在37℃时水凝胶的孔隙率数据?

非常抱歉,Cosmobio没有任何关于凝胶孔隙率的数据。但是,以下参考文献的讨论部分有关于“凝胶在不同材料中的扩散速度”的信息,可供参考。

Takao et al., Novel drug delivery system using thermoreversible gelation polymer for malignant glioma Journal of Neuro-Oncology (2005)

一般情况下,当凝胶浓度较低时,凝胶在物料中的“扩散速度”较高。因此当凝胶浓度较低时,凝胶孔隙度较高。但当凝胶浓度较低(如5%)时,不会形成凝胶。

● Mebiol Gel®最小凝胶质量分数(wt%)是多少?

最小的胶浓度大概是7 wt%。Cosmobio推荐加1 g的聚合物至10 g培养基中,这样制出来的胶浓度为9 wt%

◆ Mebiol Gel®和兼容的细胞类型问题

● 当在37℃下培养细胞时,是否可以交换培养基的类型?

当处于37℃时,凝胶不会溶于过量的水。因此,您可以将凝胶上的培养基分层,这样就可以交换分层后的培养基。

● 当细胞在生长过程中接触到水凝胶的边缘时会受到任何阻力吗?

不会。

● Mebiol Gel®是否适用于T细胞或MSC细胞的培养?

Cosmobio没有任何关于在Mebiol Gel®中培养T细胞的数据。关于MSC细胞培养,请参考以下的参考文献:

Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110

● 请问Mebiol Gel®已经成功培养过哪些类型的细胞?

请参考Cosmobio官网所列的使用Mebiol Gel®培养细胞已经发表的参考文献,链接如下:

http://export.cosmobiousa.com/contents/mebiol_lit_ref.html

● 请问可以使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞吗?是否可以提供相关的参考数据?

非常抱歉,Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞的数据。

● Mebiol Gel®是否已经被报道用于培养肠细胞?是否有可支持的参考文献?

非常抱歉,Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养肠细胞的数据。

● 在溶液状态下,提取细胞时是否会损伤细胞?

不会的。

● Mebiol Gel®是否可被用于流式细胞术?如果可以的话应该使用哪种状态的凝胶?

可以的,当Mebiol Gel®在低温下处于溶胶状态是可以被用于流式细胞术。

● Mebiol Gel®是否可被用于体内实验?如果可以的话,它可以在小鼠体内保留多长时间?

可以的,Mebiol Gel®可以被用于除人以外的其他物种的体内实验。它可以以凝胶的形式在大鼠脑内保留至少28天。更多的信息可以参考以下的参考文献:

T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a thermoreversible hydrogel”, Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)

● Mebiol Gel®对细胞具有毒性吗?如果有的话,对哪些类型的细胞可能会产生毒害作用?

Mebiol Gel®对所有的细胞均是无毒的。

● 有关于使用Mebiol Gel®培养正常或癌变的甲状腺细胞的参考文献吗?

有的,请参考以下已发表文献:

Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line・ “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)

◆ 其他问题

● Mebiol Gel®可以室温储存吗?

可以的,粉末状的Mebiol Gel®应置于室温储存。