本试剂盒内含有两种染料：钙黄绿素-AM (Calcein-AM) 和碘化丙啶 (PI)，Calcein-AM可透过活细胞膜，通过活细胞内的酯酶作用由几乎无荧光的Calcein-AM脱去AM基团生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质Calcein（Ex/Em：495nm/515nm），因此活细胞可被检测到绿色荧光。另一方面PI不能透过活细胞的细胞膜，但当细胞膜受损时PI可进入到死细胞内并与核酸结合，产生明亮的红色荧光（Ex/Em：535nm/617nm），因此死细胞会被检测到红色荧光。用490nm激发时可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞；而用545nm激发时仅可观察到死细胞。