ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552
ADP/ATP比率检测试剂盒
ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence
商品信息
储存条件:0-5度保存
运输条件:常温

特点:

●可获得稳定的ADP/ATP比值

●溶液配制后可以保存

●冷藏保存(无需解冻操作)

选择规格:
100tests

产品概述

通常情况下,当细胞内ATP浓度降低时,会由二磷酸腺苷(ADP)重新合成为ATP,以维持细胞内一定的ATP浓度。当产生ATP的相关代谢发生紊乱时,ADP无法再合成为ATP,ATP却不断地分解成为ADP,导致ADP/ATP的比例上升。而ADP/ATP比率的变化与细胞凋亡、细胞自噬、能量代谢等诸多途径息息相关,因此经常被作为细胞活性的指标之一检测。

微信截图_20211130130502.png

规格性状

1642572478856777.png

检测原理

本试剂盒可以检测细胞中ADP与ATP的比率。首先用萤火虫荧光素酶法检测细胞内的ATP。

微信截图_20211130130953.png

之后用酶将细胞内的ADP全部转化为ATP,再用相同的发光原理检测ATP,即可算出细胞内ADP/ATP的比率。

微信截图_20211130131009.png

与其他公司产品比较

微信截图_20211130131135.png

本试剂盒的检测结果,不受ATP和ADP的总量影响,比值的结果稳定。

微信截图_20211130131146.png

实验例

使用Staurosporine诱导细胞凋亡后,用本试剂盒检测细胞中ADP/ATP的比值。另外,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI染料标记的Staurosporine诱导凋亡的细胞。

结果显示,Staurosporine诱导后的细胞中ADP/ATP的比例明显上升。相同条件的细胞中也观察到磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻以及细胞膜破损。说明凋亡细胞中的ADP/ATP的比率上升。

 

<ADP/ATP比的检测结果>

 

1638249248457134.png

1638336486572893.png

常见问题Q&A

Q:一个试剂盒可以检测多少个样品?
A:按照每个样品3个复孔计算,可以检测32个样品,96孔板的孔板设置请参考说明书。
Q:检测时是否可以用白色96孔板以外的孔板?
A:黑色和透明孔板都会造成发光强度的降低,透明孔板还会导致背景升高。因此建议使用白色96孔板。
Q:配制好的working solution是否可以保存?
A:本试剂盒共包含4种working solution,ADP working solution无法保存,请现配现用。其他3种的保存条件及保存时间如下:

1638336266497998.png

Q:确定最佳细胞数的方法是什么?
A:配制梯度浓度的细胞悬液播种至孔板中,按照最终实验相同的条件进行培养。使用本试剂盒制作标准曲线(参照图1),选择呈直线性的范围,并且ADP/ATP比率(参考图2)在相对稳定的范围内进行最终实验的检测。下图的情况,最细胞数的范围是2,000~4,000个。

1638336413353486.png

Q:发光法检测波长为多少?
A:由于是通过萤光素检测,所以检测波长为556 nm。