金畔生物试剂,HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

无缝衔接 dUTP/UDG 防污染系统与一步探针法 qRT-PCR试剂盒

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

支持多重探针检测

UDG防污染系统: Heat-labile UDG 室温下迅速降解含U 的双链DNA 污染物,Heat-labile UDG 在50-55℃迅速失活,维持cDNA 的完整性

高的检测灵敏度:可检测到个位数拷贝的模板或 0.1 pg 总 RNA

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

图1. HiScript® II U + One Step qRT-PCR Probe Kit 工作原理

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

图2. 以 HeLa 细胞总 RNA 为模板,用 HiScript® II U + One Step qRT-PCR Probe Kit 扩增 RFLPO 基因

由图可见,优化的 dUTP 浓度以及 Heat-labile UDG 使得扩增效率和灵敏度不会受到影响。相比之下,E.coli 来源的 UDG 会严重影响 One Step RT-qPCR的检测灵敏度。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

dUTP/UDG 防污染系统是一种非常有效的控制 PCR 扩增产物污染的手段。在以 DNA 为模板的 PCR 检测试剂中,已逐渐成为了一种强制标准。不过,常用的 E. coli UDG 在通常的逆转录温度 (42-55℃ ) 下仍具有较高的活性,会降解 cDNA,导致 One Step RT-PCR/qPCR 的灵敏度降低。

HiScript® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit 含有比例优化的dUTP/dNTP mix,并加入了来源于嗜冷海洋细菌的Heat-labile UDG。Heat-labile UDG在室温下具有很高的活性,在反应体系混合过程中即可充分降解含U的双链DNA。当反应体系升温至50-55℃ (HiScript® II 的最适反应温度)时,Heat-labile UDG 迅速失活,维持cDNA 的完整性,保证检测灵敏度不受影响。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

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– 20℃避光保存