NEB代理 , DNA聚合酶与扩增技术 , cDNA 合成,ProtoScript® II 反转录酶,#M0368L

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – cDNA 合成

ProtoScript® II 反转录酶

#M0368L 10,000 units

#M0368S 4,000 units

#M0368X 40,000 units

相关产品

RNase H

特性

 不同起始量的 RNA 均能高效反转录
 提高热稳定性
 合成至少 10 kb 长度的 cDNA

概述

ProtoScript II 反转录酶是一种重组的 M-MuLV 反转录酶,其 RNase H 酶活性降低且热稳定性增加。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比, ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。 ProtoScript II 活性温度高达 50℃,且具有特异性高、产量高和 合成 cDNA更长的特点,合成 cDNA长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶(RNase H)。 

来源

来自重组 E. coli 菌株,携带有突变的 MMuLV反转录酶(RNase H–)编码基因,经高度纯化而获得。

反应条件

 1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl(pH 8.3 @ 25℃),75 mM KCl,3mM MgCl2],10 mM DTT,200 units M-MuLV (RNaseH–),添加 0.5 mM dNTPs(不随酶提供)和 5 μMdT23VN(不随酶提供),42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。热失活:65℃ 20 分钟。

质保声明

 通过 RT-PCR 验证,以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中,以poly(rA)为模板,以 oligo(dT)18 为引物,37℃条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶物所需要的酶量。

浓度

 200,000 units/ml。