生物素和链霉亲和素简介,aatbio,AAT Bioquest代理

The biotin-streptavidin complex is one of the most popular tagging systems for the conjugation of biomolecules, such as proteins, lipids and nucleic acids, as well as that of synthetic molecules, such as fluorescent labels. It has found strong success in the area of sample preparation as a core part of many purification systems and plays a critical role in many detection systems for instruments such as microscopy and flow cytometry.

生物素-链霉亲和素复合物是最流行的标记系统之一,用于结合生物分子,如蛋白质、脂质和核酸,以及合成分子,如荧光标记。作为许多纯化系统的核心部分,它在样品制备领域取得了巨大成功,并在显微镜和流式细胞仪等仪器的许多检测系统中发挥着关键作用。

链霉亲和素-生物素相互作用的图示。链霉亲和素的多价特性使其能够以高度亲和力结合多达四个生物素分子。生物素通常与酶、抗体或靶蛋白结合。

生物素-链霉亲和素偶联系统的广泛采用主要是由于两个因素。首先是生物素和链霉亲和素分子本身的相对较小的尺寸,这允许与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会阻碍它们的功能(即抗体的结合位点)。第二个是生物素和链霉亲和素相互结合的特异性,以及随后结合的强度,这使得强大的流线型生物测定应用成为可能。链霉亲和素四聚体对生物素具有极高的结合亲和力,解离常数 (K d ) 约为 ~10 -14摩尔/升。这种紧密而特异性的结合速度很快,能够承受极端的 pH 值、温度、有机溶剂和变性试剂。

生物素-链霉亲和素系统的优点

生物素-链霉亲和素系统的一个主要优点是它能够提高检测灵敏度。这在很大程度上是由于链霉亲和素的四聚体构象。一种链霉抗生物素蛋白能够以高亲和力和选择性结合四种生物素分子。这种多样性能够放大微弱信号,并通过简单的工作流程提高哺乳动物细胞或组织中中低丰度靶标的检测灵敏度。

另一个关键优势是生物素-链霉亲和素系统的多功能性。因为链霉亲和素可以与多种报告标签结合,所以它可以很容易地结合到几乎所有的免疫分析中。例如,链霉亲和素的酶偶联物广泛用于酶联免疫吸附试验 (ELISA),而荧光标记的链霉亲和素,如iFluor™ 488 链霉亲和素,广泛用于细胞表面标记、荧光激活细胞分选 (FACS) 和其他荧光检测。成像应用。

应用
酶联免疫吸附试验 (ELISA)
免疫组织化学 (IHC)
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免疫印迹
免疫荧光显微镜
细胞表面标记
亲和纯化
荧光激活细胞分选 (FACS)
流式细胞仪