细胞增殖,毒性检测CCK-8试剂盒,同仁Dojindo,CK04

细胞增殖-毒性检测–CCK-8试剂盒 同仁Dojindo CK04 现货,CK04,细胞增殖毒性检测试剂盒 CCK 8 同仁CCK-8细胞增殖检测试剂盒 Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖/毒性检测试剂盒,CK04 细胞增殖-毒性检测试剂盒Cell Counting Kit-8(CCK-8) CK04 CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒/CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒/CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒 CCK8试剂盒日本同仁 CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒 日本同仁cck8试剂盒 CK04 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 日本同仁化学CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒 同仁 细胞增殖毒性检测试剂盒CCK-8(CCK8) 试剂盒 Cell Counting Kit-8

cell counting kit-8 简称cck-8试剂盒,为mtt法的替代方法,是一种基于wst(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加cck-8试剂培养一定时间后测定od 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(x 轴),od 值为纵坐标(y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入cck-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μl/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% co2的条件下)。
2、向每孔加入10μl cck-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响od值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定od值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37 ℃,5% co2的条件下)。
2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μl cck-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响od值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加cck-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定od 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

活力计算:.
细胞活力(%)=[a(加药)-a(空白)]/[ a(0加药)-a(空白)]×100
a(加药):具有细胞、cck-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
a(空白):具有培养基和cck-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
a(0 加药):具有细胞、cck-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入cck-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μl培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入cck-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。

cck-8法与其它检测方法之间的比较:
细胞计数方法 mtt法 xtt 法 wst-1 法 cck-8法
形成的formazan 的水溶性 差 好 好 好
产品性状 粉末 2 瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 无需预制 无需预制
检测灵敏度 高 很高 很高 高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
大批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

日本同仁cck8试剂盒用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
日本同仁cck8试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用cck-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底sci影响因子if>10分的论文有37篇,最高if38.5分
[heterozygosity with respect to zfp148 causes complete loss of fetalgerm cells during mouse embryogenesis,nature genetics 33, 172 – 176 (01feb 2003)]
cck-8试剂与mtt等方法灵敏度比较

 cck-8试剂毒性:cck-8和其他检测方法对比可以得出——cck-8对细胞几乎无毒性,不伤害细胞,细胞可重复利用。

品牌 货号 产品名称 规格
日本同仁dojindo ck04-100 cell counting kit-8 100tests
日本同仁dojindo ck04-500 cell counting kit-8 500 tests
日本同仁dojindo ck04-1000 cell counting kit-8 1000 tests
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