Cell Counting Kit-8(简称CCK-8),是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。
CCK-8试剂中含有WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)是一种类似于MTT的化合物,它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在条件下,可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan (参考图1),生成的Formazan数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
WST-8与以往的增殖/毒性测定试剂相比,具有明显优点(参考表1)。金畔生物CCK-8试剂盒具有灵敏度高、反应时间短、线性范围宽、数据可靠、重现性好等特点,可以广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。
表1. 增殖/毒性测定试剂的比较
检测方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
甲瓒产物的水溶性 |
差(需加有机溶剂溶解) |
好 |
好 |
好 |
检测灵敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
最高 |
检测时间 |
较长 |
较短 |
较短 |
最短 |
检测波长 |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
细胞毒性 |
高,细胞形态完全消失 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
试剂稳定性 |
一般 |
较差 |
一般 |
很好 |
批量样品检测 |
可以 |
非常适合 |
非常适合 |
非常适合 |
便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
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英文名字:Cell Counting Kit-8