产品描述
金畔生物细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 (Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit) 采用经典的碘化丙啶染色 (PI staining) 方法，通过流式细胞仪分析对细胞周期与细胞凋亡进行检测。
细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，在这个过程中，细胞遗传物质复制并加倍，且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期分为间期与分裂期（M期）两个阶段，间期又分为：休眠期（G0）、DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA 合成后期（G2期）。利用细胞内DNA能够和荧光染料（如碘化丙啶）结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，检测到的荧光强度也不一样，从而反应出细胞周期的各个期的状况，即细胞增殖状况。
碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性。PI与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被PI染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，从而进行细胞周期和细胞凋亡的分析。假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化 (DNA fragmentation) 导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。PI染色还可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时，出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的前向角光散射 (FSC) 低于正常。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射 (FSC) 的能力显著降低，对侧向角光散射 (SSC) 的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，FSC和SSC的信号均降低。细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀，因此FSC高于正常，SSC高于正常。
本试剂盒适用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。当用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测时，则须把组织消化成单细胞状态。该试剂盒检测每个样品细胞含量范围一般为105-106之间，足够检测50个样品。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。碘化丙啶PI染色液(20X)需避光保存。本试剂盒可4℃保存，一个月内有效。
注意事项：
1.请使用流式细胞仪进行检测，进样速度调为低速，若峰形较宽，可能因为进样速度太快。
2.请按照说明书提供的细胞固定方法进行操作，尽量获得单个细胞，并避免DNA的降解。
3.细胞样品尽量减少碎片的产生，请注意不要消化过度，不可过度吹打，离心转速不能过高。
4.需自备PBS(金畔生物货号：MA0015) 和无水乙醇。
5.荧光染料均存在淬灭问题，碘化丙啶PI染色液保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。建议染色后尽量当天完成检测。
6.碘化丙啶对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
操作指南
操作方法：请参考说明书
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